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移液器不能灭菌,如何实现无菌操作?

实验中

需要用移液枪来移液


(资料图片)

枪头灭菌了但枪不能灭菌

怎么实现无菌操作?

支招

1.有可以灭菌的移液枪,如果没有,还是用吸管好。别图省事~或者可以用紫外线进行照射,表面灭菌还可以。

2.枪头灭菌,移液枪70%酒精擦拭。移液时注意慢吸快打,移液量不超过枪头2/3。

3.可以在枪头上部塞上脱脂棉再去灭菌,然后再使用。

4.做活菌计数就用移液枪做梯度稀释,没有问题,很少有杂菌污染。

体会

1.移液枪可以浸泡在75%酒精中过夜,甚至更长时间。

2.移液时枪尽量不要碰到器皿壁。

3.最好在超净工作台上操作,超净工作台内的空气可以认为是无菌的,这样吸进枪管中的空气很少,可以认为样品不会被污染。

4.操作熟练程度关系实验成败,建议先用普通肉汤培养基,和其他非实验菌进行操作练习,熟练后再进行正式试验。

5.关键是灭菌的tip头是要有脱脂棉的tip头,然后对移液枪进行表面消毒就行了。

6.可以将一般的移液枪放在超净台中,打开紫外灯灭菌半小时,使用时先将移液枪用(70%-75%)酒精棉擦拭表面,然后在酒精灯火焰上2cm左右处将移液枪反复吹打几次即可。

7.移液枪放置在超净台中和台子一起紫外灭菌半小时;枪身用75%酒精擦拭;枪头塞入脱脂棉一起灭菌。

8.枪头是经过高压消毒的,直接接触液体的是枪头又不是别的,剩下的无非就是无菌操作的问题了,紫外线消毒移液枪就足够了。

小结

关于如何保证移液器的无菌使用,不少朋友提出用紫外线照射,实际上并不恰当。首先,移液器的杆柄(通常为白色部分)是有机高分子化合物,说白了就是类似塑料的东西。日常生活中大家知道,露天暴晒的塑料容易变脆。经常用大剂量、长时间的紫外线照射移液器同样会极度加速其老化。我们实验室曾经有一把枪从前面的金属圈处断掉,维修人员给出的解释之一就是经常照射使其脆性增加。

其次,将移液器放在超净台中照射时,其靠近台面的一侧以及被金属架遮盖的部分并不能被照到,所以消毒是不彻底的。

有朋友提出将移液器在酒精灯2cm处反复吸吹几次以消毒内部空气的方法。这样操作时移液器的的末端同样可能因温度高而加速老化,天长日久甚至可能导致局部变形,而一旦末端不是绝对的圆润,且老化后丧失应有的弹性,其与枪头之间的密封性将不能得到保证。

另外对于实验室多人公用的移液器,有时会有人不注意就将培养液等吸入移液器杆柄而又未能及时清理,最后会在杆柄内部形成卫生死角,甚至成为污染源。

保养方法

1.日常消毒,用70%酒精棉球擦拭移液器杆柄表面。使移液器末端稍低于手持端并使金属推杆在下方,使用吸满酒精的棉球,还能够保证移液器的金属退杆内面被酒精覆盖、消毒。按动金属退杆同时擦拭被退杆末端环柄包住的部分。对重要实验若需更加仔细消毒,可将金属退杆拔下,彻底擦拭消毒。

2.不定期将金属退杆拔下,将白色塑料杆柄处拧下,用酒精棉球清理杆柄内部。此时可能需要使用钝头铁丝等挟持小棉球以便够著末端较细的部位。

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